طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

Authors

  • آریان, احسان مرکز تحقیقات مقاومت‌های میکروبی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
  • درخشان, محمد مرکز تحقیقات مقاومت‌های میکروبی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
  • مشکات, زهرا مرکز تحقیقات مقاومت‌های میکروبی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
  • یعقوبی, عطیه مرکز تحقیقات مقاومت‌های میکروبی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
Abstract:

هدف: سل از مهم‌ترین بیماری‌های عفونی و از شایع‌ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می‌باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می‌شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می‌باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت  کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد. مواد و روش‌ها: ابتدا قطعه tb10.4 با روش PCR تکثیر، با استفاده از آنزیم‌های محدودالاثر مناسب هضم و در  پلاسمید pcDNA3.1+ کلون شد. سپس قطعه hspX با PCR تکثیر و با آنزیم‌های محدودالاثر HindIII و BamHI هضم شد. پلاسمید نوترکیب pcDNA3.1+/tb10.4 نیز با آنزیم‌های فوق هضم و قطعه hspX در hspX در وکتور نوترکیب مذکور ساب کلون و در باکتری E.coli سویه TOP 10 ترانسفورم شد. تایید کلونی‌های نوترکیب  با کلونی-PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی صورت گرفت. یافته‌ها: محصولات PCR و هضم آنزیمی بر روی ژل آگاروز الکتروفورز شد که وجود قطعات tb10.4 و hspX با اندازه bp 291 جفت بازو bp 435جفت باز به ترتیب مشاهده شد. نتایج تعیین توالی 100% همولوژی با توالی‌های ژن‌های hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس سویه مذکور H37Rv ثبت شده در بانک ژنی را نشان دادند. نتیجه‌گیری: کلونینگ دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در وکتور pcDNA3.1+ به درستی انجام شد. این وکتور می‌تواند در آینده پس از تایید بیان آن در سلول‌های یوکاریوتی، به عنوان کاندید DNA واکسن DNA واکسن در القای سیستم ایمنی در مدل‌های آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گیرند

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspx و tb ۱۰.۴ مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

هدف: سل از مهم ترین بیماری های عفونی و از شایع ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت  کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspx و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می باشد. مواد و...

full text

طراحی و ساخت وکتور پلاستیدی حاوی ژن badh

انتقال ژن های خارجی به کلروپلاست گیاهان دارای مزایای زیادی است که می توان به بیان بالای پروتئین های خارجی و عدم آلودگی زیست محیطی اشاره کرد. با توجه به توالی یابی ژنوم پلاستید کاهو می توان قطعات همولوگ زیادی را برای طراحی وکتور به منظور تولید پروتئین های نوترکیب در این گیاه استفاده کرد. در این پژوهش از قطعات همولوگ rbcl-accd و پروموتر prrn و ترمیناتور tpsba برای ژن هدف همراه قطعه ژنی badh مقاوم...

full text

طراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری

Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...

full text

کلونینگ وتعیین (hsp70 (c-terminal از مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در وکتور بیانی pqe-30

پروتئینهای شوک حرارتی (hsp) ،از مایکو باکتریوم توبرکلوزیس، توسط سلولهای t شناسایی می شوند و لذا می توانند در همراهی با آنتی ژنهای مناسب پاسخ ایمنی قابل قبولی را بر علیه عفونتهای ویروسی، عفونتهای باکتریال و یا سایر عوامل عفونی القا نمایند. مهمترین دلیل ما نیز برای استفاده از ( c-terminal )hsp70 359-610 ،خاصیت adjuvant قوی این بخش از مولکول hsp70 است. این مولکولها می تواند پاسخ سلولهای ایمنی را...

15 صفحه اول

طراحی و ساخت پلاسمید نوترکیب حاوی ترکیب ژن های ag۸۵b و tb۱۰.۴ مایکوباکتریوم توبرکولوزیس

پیش زمینه و هدف: علی رغم استفاده از واکسن ب.ث.ژ از سال 1921 تابه حال، هنوز بیماری سل به عنوان دومین عامل مرگ ومیر در بین بیماری های عفونی محسوب می گردد. با افزایش مقاومت عامل مولد سل (مایکوباکتریوم توبرکولوزیس) به آنتی بیوتیک های معمول و وسیع الطیف و همچنین با ظهور hiv و عفونت این ویروس با مایکوباکتریوم توبرکولوزیس، مقابله با این بیماری بیشتر به چالش کشیده شده است. شناخت آنتی ژن های مؤثر در ایم...

full text

ساخت و کلونینگ وکتور بیانی نوترکیب حاوی ژن cd۲۰ انسانی با هدف ایمونوتراپی برای لنفومای غیر هوجکین

چکیده مقدمه: لنفومای غیرهاجکینی (nhl) سرطانی است که در لنفوسیت ها رخ می دهد. درمان اصلی nhl شیمی درمانی و پرتودرمانی می باشد. امروزه ایمونوتراپی یک روش درمانی امیدوارکننده در درمان انواعی از سرطان هاست که برخلاف روش های قبلی از اختصاصیت بالایی برخوردار است. اندازه بزرگ آنتی بادی ها مانع از نفوذ مؤثر آن ها در بافت توموری می شود. در حالی که نانوبادی ها به دلیل سایز کوچک شان وارد بافت و به اپی توپ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 19  issue 1

pages  183- 190

publication date 2017-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023